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PC抽提的关键是，一要混匀彻底，二要用量足够。彻底混匀，才能确保苯酚与蛋白质的充分接触，使蛋白质完全变性。许多人总是担心混匀的剧烈程度是否会对核酸，尤其是基因组DNA造成破坏，实际上大可不必如此小心。剧烈的混匀操作，是会部分打断大分子的基因组DNA，北京自动核酸提取批发厂家，但该破坏作用不会强烈到DNA变成10kb以内的小片段。手剧烈晃动混匀后，基因组DNA的片段，北京自动核酸提取批发厂家，大部分会大于20kb，这个大小，除了一些特别的要求外，对PCR和酶切，北京自动核酸提取批发厂家，都是完全适用的。     提高温度和增加裂解时间可以让细胞裂解更彻底，得到更多核酸。北京自动核酸提取批发厂家

磁珠法核酸提取，具有传统DNA提取方法无法比拟的优势，主要体现在：①能够实现自动化、大批量操作，目前已有96孔的核酸自动提取仪，用一个样品的提取时间即可实现对96个样品的处理，符合生物学高通量的操作要求，使得传染性疾病爆发时能够进行快速及时的应对，这一特点使得传统方法望尘莫及；②操作简单、用时短，整个提取流程只有四步，大多可以在36-40分钟内完成；③安全无毒，不使用传统方法中的苯、氯仿等有毒试剂，对实验操作人员的伤害减少到较少，完全符合现代环保理念；④磁珠与核酸的特异性结合使得提取的核酸纯度高、浓度大。南京全血核酸提取批发在样本中直接加入一种高效的核酸释放剂，可快速破坏细胞或病原体外壳蛋白结构。

磁棒法核酸提取仪：通量通常有8、16、32、96通道，磁棒只带走磁珠，转移到下一个步骤相应的反应孔中，另外选择磁棒法的提取仪器较好要功能更齐全的，比如可以加热，每个加热槽较好单独温控，这样可以设置加热、裂解、洗脱的不同温度，另外很重要的一点是，带动磁棒的电机要能带动磁棒进行液体的快速混匀和搅拌，这样才有利于自动化和有助于裂解和漂洗彻底。磁棒法核酸提取仪混匀方式1)震荡混匀：通过磁棒的上下震动混匀磁珠和核酸，为市面上主流方法2)旋转混匀：通过磁棒的旋转混匀磁珠和核酸，相比传统的振荡式混匀技术，气溶胶的产生量大幅降低50%以上。交叉污染而导致的假阳性风险被更有效控制，进一步**实验结果的准确性。另外，旋转的混匀方式较大限度的保留了DNA的长链，减少核酸机械的断裂，提高后续检测的灵敏度。

核酸分离与纯化的步骤：(1) 机械作用:包括低渗裂解、超声裂解、微波裂解、冻融裂解和颗粒破碎等物理裂解方法。这些方法用机械力使细胞破碎,但机械力也可引起核酸链的断裂,因而不适用于高分子量长链核酸的分离。有报道超声裂解法提取的核酸片段长度从< 500bp ～ > 20kb 之间,而颗粒匀浆法提取的核酸一般< 10kb。(2) 化学作用:在一定的p H 环境和变性条件下,细胞破裂,蛋白质变性沉淀,核酸被释放到水相。上述变性条件可通过加热、加入表面活性剂(SDS、Triton X-100 、Tween 20 、NP-40 、CTAB、sar-cosyl 、Chelex-100 等) 或强离子剂(异硫氰酸胍、盐酸胍、肌酸胍) 而获得。而p H 环境则由加入的强碱(NaOH) 或缓冲液 ( TE、STE 等) 提供。在一定的p H 环境下,表面活性剂或强离子剂可使细胞裂解、蛋白质和多糖沉淀,缓冲液中的一些金属离子螯合剂( EDTA 等) 可螯合对核酸酶活性所必须的金属离子Mg2+ 、Ca2+ ,从而克制核酸酶的活性,保护核酸不被降解。核酸提取纯化原则和要求：核酸样品中不应存在对酶有克制作用的**溶剂和高浓度的金属离子。

核酸降解：核酸降解的现象主要表现为，主带并不**，向小片段方向发生弥散，亮度比较均衡地衰减。以目前核酸提取方法的能力，在裂解和提取过程中除了操作失误几乎并不会导致核酸的降解，所以出现提取核酸降解的情况，一般为样品本身在提取前就有一定程度的核酸降解。样品本身出现核酸降解一般分为两种，一种是样品采集和保存出现问题，比如以RNA提取为目的的样品在采集后在常温下存放了很长时间；另一种是样品本身就存在一定的核酸降解，比如土壤或沉积物样品中本身就存在很多长短不一的胞外DNA。高活性的表面活性基团与核酸分子特异性识别和高效结合。南京全血核酸提取批发

磁珠法利用核酸自动提取仪进行核酸提取。北京自动核酸提取批发厂家

核酸的物理性质：①黏性：DNA的高轴比等性质使得其水溶液具有高黏性，很长的DNA分子又易于被机械力或超声波损伤，同时黏度下降。② 浮力密度：可根据DNA的密度对其进行纯化和分析。在高浓度分子质量的盐溶液（CsCl）中，DNA具有与溶液大致相同的密度，将溶液高速离心，则CsCl趋于沉降于底部，从而建立密度梯度，而DNA较终沉降于其浮力密度相应的位置，形成狭带，这种技术成为平衡密度梯度离心或等密度梯度离心。③稳定性：核酸的结构相当稳定，其主要原因有1、碱基对间的氢键2、碱基的堆积作用3、环境中的阳离子。北京自动核酸提取批发厂家